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CCK-8 細(xì)胞增殖及毒性檢測的步驟詳細(xì)說明

  CCK-8 細(xì)胞增殖及毒性檢測的步驟詳細(xì)說明

  1. 向各孔中加入100 μl細(xì)胞懸液。a)

  2. 在37℃下預(yù)孵育培養(yǎng)板。b)

  3. 向各孔中加入各濃度的待測溶液c)10 μl。

  4. 37℃下孵育。

  5. 向各孔中加入10 μl的CCK-8溶液d)。

  6. 37℃下孵育1-4小時。e)

  7. 測定450 nm處的OD值。

  a) 使用適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)基制備50,000-100,000個/ml的細(xì)胞懸液。

  b) 建議使用CO2培養(yǎng)箱guo夜預(yù)培養(yǎng)。

  c) 使用培養(yǎng)基或PBS來制備溶液。

  d) 如果待測溶液有還原性,測定不含細(xì)胞,但含有CCK-8的待測溶液在450 nm處的空白吸光度。如果該吸光度很小,則可以直接加入CCK-8 ,如果吸光度相對較大,則需要除去培養(yǎng)基,并用培養(yǎng)基洗滌細(xì)胞兩次,然后加入新的100 μl培養(yǎng)基和10 μl CCK-8進(jìn)行檢測。

  e) 白細(xì)胞可能需要培養(yǎng)較長時間。

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